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组织细胞RNA提取试剂盒(Trizol提取法)图片
产品货号:
GL2820
中文名称:
组织细胞RNA提取试剂盒(Trizol提取法)
英文名称:
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

适用于从各种组织或细胞中快速分离总RNA,既可用于小量样品(50~100mg组织、5×106细胞),也可用于大量样品(>1g组织/>107细胞),提取的总RNA质量高,可用于Northern Blot、Dot Blot、polyA筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆。




适用范围广;操作简单,整个过程1小时内完成;纯度高、污染少。


组分规格保存
Trizol Reagent50mL4℃,避光
RNA分离液10mL 室温
RNA沉淀液50mL
RNA洗涤液50mL
RNase-free ddH2O10mL
RNA保存液10mL

保存:2~8℃,避光,有效期1年。


  • 液氮、研钵或匀浆器
  • 经RNase free处理的移液器吸头、EP管等耗材
  • 低温高速离心机、低温冰箱



  • 样品保存:加入Trizol Reagent混匀后,样品可在-70℃放置1~2月;RNA样品可以在70%酒精中-70℃保存2~4周;如果需要长期保存,应置于超低温冰箱中保存。
  • Trizol Reagent和RNA分离液含有腐蚀性物质,污染皮肤或眼睛后,立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
  • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
  • 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。



  • 样品准备
    • 贴壁细胞:
      ① 直接裂解:直接在培养瓶/皿中加入Trizol Reagent裂解细胞,每10cm2面积加1mL,用移液器吹打混匀。
      ② 胰蛋白酶消化:用无菌PBS洗涤细胞后,加入含有0.05~0.25%胰蛋白酶的PBS处理细胞,当细胞脱离容器壁后,加入含有血清的培养基终止反应,将细胞溶液转移至无RNase的离心管中,以下参考悬浮细胞相关操作步骤。
    • 悬浮细胞:无需清洗细胞,直接5000~6000g离心5min,收集细胞沉淀,去除上清。收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净,否则裂解不完全,降低RNA收获率,每5×106~107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1mL Trizol Reagent,充分振荡混匀。
    • 组织:取新鲜动物或者植物组织或者-70℃冻存组织,50~100mg组织在液氮中充分研磨或者加入1mL Trizol Reagent研磨或者用匀浆器匀浆处理,样品体积一般不超过Trizol Reagent体积的10%,研磨要迅速,以1min为佳。
    • 血液:取0.5~1mL新鲜或冻存的血液,12000g离心5min,去除血浆,加入1mL Trizol Reagent,充分振荡混匀。
  • 核酸分离:充分振荡混匀(可以置于低温/超低温冰箱冻存5~10min后,充分振荡,反复1~3次),将裂解样品或匀浆液室温静置5~10min,使核蛋白与核酸完全分离。
  • 样品分层:加入0.2mL RNA分离液,振荡15s,室温静置2~3min,12000g 4℃离心10~15min,上层为水相,中间层和下层为有机相,RNA在上层水相。
  • 沉淀RNA:吸取上层水相(约500μL)转移至无RNase的离心管中(不要吸取任何中间层物质,否则会有染色体DNA污染),加入等体积RNA沉淀液混匀,室温放置15~20min,12000g 4℃离心10min,离心后管侧或管底形成胶状沉淀,弃上清。
  • 洗涤RNA:加入1mL RNA洗涤液轻轻洗涤沉淀,室温放置5~10min,7500g 4℃离心5min,弃上清,室温干燥5~10min,不宜过分干燥,否则RNA难以溶解。
  • 溶解RNA:加入30~50μL RNase-free ddH2O充分溶解,-70℃长期保存或直接用于后续试验,对于肝、胰腺、肾等组织中RNase含量高的样品沉淀用RNA保存液溶解。

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